引物设计网站，诺唯赞引物设计网站

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于引物设计网站的问题，于是小编就整理了4个相关介绍引物设计网站的解答，让我们一起看看吧。

怎么用primer-blast设计引物？

Primer-BLAST，在线设计用于聚合酶链反应（PCR）的特异性寡核苷酸引物。 这个工具整合了目前流行的Primer3，再加上NCBI的 Blast进行引物特异性的验证。

Primer-BLAST免除了用另一个站点或工具设计引物的步骤，设计好的引物程序直接用Blast进

同源重组引物怎么设计策略？

同源重组的基因克隆方法， 相比双酶切载体构建方法，该方法的构建过程有些不同。首先，靶基因片段扩增引物有别于常规引物设计；

其次，载体切割过程中只需要进行单酶切；

第三，载体和目的基因片段的连接是基于同源重组而不是粘性末端互补。

设计引物时,扩增产物的长度是如何知道？

建议先看一下针对你的研究所设计引物的一些具体文章，不同的引物有不同的设计方法，引物设计好以后，要经过验证的，同一类引物只可能在同一类模板材料中才能扩增，而在另一种材料种可能没有扩增，由于不同材料DNA序列间的indel等突变，扩增产物的长度是通过设计引物后的验证实验得出，一般只做参考，具体长度要靠具体的实验结果而定。

ssr引物设计原则和注意事项？

引物自身及引物之间不应存在互补序列。连续互补的碱基应该要少于4 个。引物

应使其△G 值不要太高，△G 值越大，则双链越稳定。

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引物长度和GC 含量要适中。引物长度大概为18~28 bp，但不应大于38 bp，引物过短会影响到扩增的特异性，太长的话其延伸温度将会大于74 ℃，不利Taq 酶的催化反应。若扩增产物为4~5 kb，引物最好不要少于24bp；如果目的产物≤500 bp，引物长度只要16~18 bp 即可。上下游引物间的Tm 值的差值最好在10 ℃以内，GC 含量最好是40%~60%。

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3′端不应该存在相似性高的序列，否则容易导致错配。3′端不能有多于3 个连续的G 或C，要不然引物错配会在GC 富集区。

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引物3′端不能修饰，5′端可以修饰，还尽量要避开密码子第3 位。同时要注意选择3′端△G 值相对较低，5′端和中间△G 值较高的引物。

1、首先引物与模板的序列要紧密互补。

2、其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构。

3、再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应即错配。

4、引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与目的基因一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与目的基因另一端的另一条DNA模板链互补。

到此，以上就是小编对于引物设计网站的问题就介绍到这了，希望介绍关于引物设计网站的4点解答对大家有用。